Quais dos seguintes métodos você usaria para corrigir a contagem de plaquetas em caso de agregação plaquetária induzida por EDTA na trombocitopenia?
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• Verificação do esfregaço sanguíneo e contagem de plaquetas
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• Verificação com adição de amicacina
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• Verificação após o aquecimento a 37 °C
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• Verificação sem adição de anticoagulante
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• Repetição em outro dispositivo de hematologia
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• Verificação com outros anticoagulantes
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A Pseudotrombocitopenia dependente de Ácido etilenodiaminotetracético (EDTA-PTCP) é um artefato laboratorial que pode levar a uma avaliação incorreta e ao tratamento desnecessário dos pacientes.

Quais dos seguintes métodos você usaria para corrigir a contagem de plaquetas em caso de agregação plaquetária induzida por EDTA na trombocitopenia?

• Verificação do esfregaço sanguíneo e contagem de plaquetas
  
• Verificação com adição de amicacina
  
• Verificação após o aquecimento a 37 °C
  
• Verificação sem adição de anticoagulante
  
• Repetição em outro dispositivo de hematologia
  
• Verificação com outros anticoagulantes
   

Médicos profissionais de laboratório clínico buscam precisão e verdade com o mais alto senso de responsabilidade. Atualmente, alguns estudos clínicos foram conduzidos para explorar soluções de EDTA-PTCP e sugerem que os sistemas de hematologia da Mindray com a tecnologia SF Cube seriam uma opção para auxiliar os técnicos de laboratório na contagem correta de plaquetas.

Esta paciente é uma mulher de 32 anos com infertilidade. Depois que o sangue anticoagulado com EDTA da paciente foi coletado, a amostra foi analisada em cinquenta e cinco minutos e mostrou uma baixa contagem de plaquetas (28 × 10⁹/L). O teste foi feito pelo método de impedância (PLT-I) em um sistema de hematologia de marca popular (dispositivo A). A agregação plaquetária foi confirmada por exame microscópico do esfregaço, indicando pseudotrombocitopenia (PTCP). Pouco depois, um re-exame desta amostra foi feito usando o método CDR (PLT-O) no equipamento da Mindray BC-6800Plus. Os resultados mostraram uma contagem de plaquetas evidentemente maior com um valor de 180 × 10⁹/L.
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Caso clínico

Esta paciente é uma mulher de 32 anos com infertilidade. Depois que o sangue anticoagulado com EDTA da paciente foi coletado, a amostra foi analisada em cinquenta e cinco minutos e mostrou uma baixa contagem de plaquetas (28 × 10⁹/L). O teste foi feito pelo método de impedância (PLT-I) em um sistema de hematologia de marca popular (dispositivo A). A agregação plaquetária foi confirmada por exame microscópico do esfregaço, indicando pseudotrombocitopenia (PTCP). Pouco depois, um re-exame desta amostra foi feito usando o método CDR (PLT-O) no equipamento da Mindray BC-6800Plus. Os resultados mostraram uma contagem de plaquetas evidentemente maior com um valor de 180 × 10⁹/L.

Suspeitou-se que a baixa contagem de plaquetas obtida pelo dispositivo A foi devido ao PTCP induzido por EDTA. Assim, foi solicitado a paciente seu consentimento para um teste adicional usando um tubo de amostra de sangue com citrato de sódio desta vez. A análise foi realizada trinta minutos após a coleta da amostra. Os parâmetros de plaquetas resultantes das amostras de sangue executados por meio de vários métodos de teste e dispositivos estão listados na Tabela 1.

Sob avaliação microscópica do esfregaço de sangue anticoagulado com EDTAa agregação plaquetária foi encontrada, enquanto no sangue anticoagulado com citrato de sódio o mesmo não foi identificado. As amostras de sangue foram analisadas em até quatro horas a partir do momento da coleta, de acordo com as instruções do fabricante. Além desse paciente, foram coletados e avaliados os dados de mais cinco casos de EDTA-PTCP (Tabela 2).
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Comparação adicional de outras amostras

Sob avaliação microscópica do esfregaço de sangue anticoagulado com EDTAa agregação plaquetária foi encontrada, enquanto no sangue anticoagulado com citrato de sódio o mesmo não foi identificado. As amostras de sangue foram analisadas em até quatro horas a partir do momento da coleta, de acordo com as instruções do fabricante. Além desse paciente, foram coletados e avaliados os dados de mais cinco casos de EDTA-PTCP (Tabela 2).

No final, o autor conclui: Em pacientes com EDTA-PTCP conhecida ou suspeita, a tecnologia Mindray SF-Cube é uma maneira direta e eficaz de determinar a contagem de plaquetas no sangue anticoagulado com EDTA.

As amostras que acionaram o flag “agregação PLT” no analisador de hematologia mostraram uma irregularidade serrilhada típica e uma cauda em zigue-zague (Figura 1) no histograma de plaquetas. Além disso, na avaliação microscópica, a presença de satelitismo plaquetário, ou plaquetas gigantes, não foi observada.
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Identificação e características das amostras de EDTA-PTCP

As amostras que acionaram o flag “agregação PLT” no analisador de hematologia mostraram uma irregularidade serrilhada típica e uma cauda em zigue-zague (Figura 1) no histograma de plaquetas. Além disso, na avaliação microscópica, a presença de satelitismo plaquetário, ou plaquetas gigantes, não foi observada.

Vinte e três amostras de EDTA-PTCP em tubos de EDTA (com agregação plaquetária) foram testadas na impedância (PLT-I (EDTA)) e no canal de reticulócitos do Mindray BC-6800 (PLT-O (EDTA)). Curiosamente, os resultados do PLT-O (EDTA) foram comparáveis às contagens de plaquetas das amostras recoletadas em tubos de citrato (PLT-I (Citrato)), o que prova que o método PLT-O (EDTA) pode ajustar a contagem plaquetária causada pelo EDTA com precisão (Figura 2).
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Baixas contagens de plaquetas espúrias no BC-6800 por contagem óptica de plaquetas (PLT-O)

Vinte e três amostras de EDTA-PTCP em tubos de EDTA (com agregação plaquetária) foram testadas na impedância (PLT-I (EDTA)) e no canal de reticulócitos do Mindray BC-6800 (PLT-O (EDTA)). Curiosamente, os resultados do PLT-O (EDTA) foram comparáveis às contagens de plaquetas das amostras recoletadas em tubos de citrato (PLT-I (Citrato)), o que prova que o método PLT-O (EDTA) pode ajustar a contagem plaquetária causada pelo EDTA com precisão (Figura 2).

A contagem óptica de plaquetas por fluorescência está disponível em analisadores hematológicos de última geração (dispositivo B) e nos analisadores hematológicos Mindray BC-6000. Neste método, um corante fluorescente é usado para tingir os ácidos nucleicos nas plaquetas, permitindo o reconhecimento de plaquetas grandes e excluindo partículas não plaquetárias, como restos de eritrócitos, micro eritrócitos ou fragmentos de leucócitos.

Efeito de dissociação EDTA-PTCP do sistema de hematologia de uma marca principal:Disponível com coloração fluorescente?

A contagem óptica de plaquetas por fluorescência está disponível em analisadores hematológicos de última geração (dispositivo B) e nos analisadores hematológicos Mindray BC-6000. Neste método, um corante fluorescente é usado para tingir os ácidos nucleicos nas plaquetas, permitindo o reconhecimento de plaquetas grandes e excluindo partículas não plaquetárias, como restos de eritrócitos, micro eritrócitos ou fragmentos de leucócitos.

Para verificar se o efeito de dissociação da contagem de plaquetas de fluorescência óptica era dependente da coloração com corante fluorescente, 17 daquelas 23 amostras de EDTA-PTCP em tubos de EDTA também foram testadas no canal de reticulócito e canal de impedância do dispositivo B. Nenhuma diferença significante foi observada entre a contagem de plaquetas do canal de reticulócitos e do canal de impedância (Figura 3). Apenas uma das 17 amostras de EDTA-PTCP mostrou uma taxa de dissociação de mais de 80%, com uma taxa de dissociação média de 56% entre todas as 17 amostras de EDTA-PTCP (Figura 3).

Em resumo, o autor conclui: A contagem de plaquetas por fluorescência óptica do analisador de hematologia BC-6800 é eficaz para a correção de contagens baixas de plaquetas espúrias em pacientes com EDTA-PTCP e seu efeito de dissociação em amostras de EDTA-PTCP é independente da coloração com corante fluorescente.
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Conclusão

Em resumo, o autor conclui: A contagem de plaquetas por fluorescência óptica do analisador de hematologia BC-6800 é eficaz para a correção de contagens baixas de plaquetas espúrias em pacientes com EDTA-PTCP e seu efeito de dissociação em amostras de EDTA-PTCP é independente da coloração com corante fluorescente.

No intenso trabalho diário do laboratório, o PTCP é um problema inevitável. A tecnologia Mindray SF Cube fornece a mediçã de PLT-O (com base na coloração fluorescente de ácido nucleico e feito no canal RET) para corrigir contagens de PLT quando há redução de pseudoplaquetas devido ao EDTA. O PLT-O está disponível no Analisador de hematologia automática Mindray BC-6000 Series e na linha de análise celular CAL 8000/6000.

[1] J. Deng, et al. Tecnologia Mindray SF-Cube: Uma maneira eficaz de corrigir a contagem de plaquetas em indivíduos com pseudo trombocitopenia dependente de EDTA. Clinica Chimica Acta 502 (2020) 99–101
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[2] Y. Bao, et al. Correção de contagens de plaquetas baixas espúrias por contagem de plaquetas de fluorescência óptica do analisador de hematologia BC-6800 em pacientes com pseudo trombocitopenia dependentes de EDTA. Transl Cancer Res 2020; 9 (1): 166-172

Referências:

[1] J. Deng, et al. Tecnologia Mindray SF-Cube: Uma maneira eficaz de corrigir a contagem de plaquetas em indivíduos com pseudo trombocitopenia dependente de EDTA. Clinica Chimica Acta 502 (2020) 99–101

[2] Y. Bao, et al. Correção de contagens de plaquetas baixas espúrias por contagem de plaquetas de fluorescência óptica do analisador de hematologia BC-6800 em pacientes com pseudo trombocitopenia dependentes de EDTA. Transl Cancer Res 2020; 9 (1): 166-172